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分子生物學實驗基礎知識

分子生物學是在生物化學基礎上發展起來的，以研究核酸和蛋白質結構、功能等生命本質的學科，在核酸、蛋白質分子水平研究發病、診斷、治療和預后的機制。其中基因工程（基因技術，基因重組）是目前分子生物學研究熱點，這些技術可以改造或擴增基因和基因產物，使微量的研究對象達到分析水平，是研究基因調控和表達的方法，也是分子水平研究疾病發生機制、基因診斷和基因治療的方法。轉化（transformation）、轉染、轉導、轉位等是自然界基因重組存在的方式，也是人工基因重組常采用的手段。基因重組的目...

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液相色譜儀常見故障及解決方法

1、氣泡溢出流動相內有氣泡，關閉泵，打開泄壓閥，打開purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進入流動相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內，過濾器內部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開pu...

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蛋白質定量實驗步驟

(1)準備100~1500ug/ml的標準品,溶于Bradford法相兼容緩沖液中。對于較稀的樣品，可能通過增加樣品在試劑體積中的比率而擴大靈敏度（microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果樣品與染料的比值太高,可能會增加反應混合物的PH而導致反應背景較高。(2)將標準品和待測樣品加人到一次性的比色皿中(應該使用一次性的塑料比色皿或微孔板，因為染料會黏附到各種材料容器的表面上）。(3)Bradford試劑預熱至室溫。將ImL染料溶液加人到25uL蛋白質樣...

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離子色譜-電感耦合等離子體光譜聯用檢測食品樣品中硼砂（硼酸）

采用IonPacICE-Borate離子排斥色譜柱，等度淋洗條件下即可良好保留游離態硼酸，而絡合態硼酸不干擾測定。利用電感耦合等離子光譜儀作為檢測手段則可大大增強檢測的選擇性，排除了食品中常見有機酸對于硼酸的干擾。但是由于離子色譜流動相的稀釋效應，檢出靈敏度會有一定損失。

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離子色譜法-紫外檢測環境地表水樣中丁基黃原酸

采用IonPacAS16陰離子交換色譜柱，等度淋洗條件下即可實現丁基黃原酸與常見地表水樣品中共存離子組分的良好分離。紫外檢測器可增強方法的選擇性，常見離子在選擇波長下無明顯響應從而不干擾丁基黃原酸的測定。離子色譜柱可以兼容更大體積的進樣量，同時使用2mm微孔色譜柱還可以進一步提高檢測靈敏度，在500μL進樣量下方法檢出限可達到0.1μg/L，遠優于傳統比色等方法，與UPLC-MS-MS檢測能力相當。此方法要求儀器配置簡單，重現性好，靈敏度高，可較好滿足GB3838-2002的...

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